my-Budget Hot-Start
Taq-DNA-Polymerase

my-Budget Hot-Start Taq-DNA-Polymerase

Konzentration: 5 Units/µl

Inklusive neuem Pufferset: 10 x Puffer A1, 10 x Puffer B1, 10 x Puffer B2, 25 mM MgCl₂, 10 x Lösung S

Technische Daten

Quelle: Ursprungsform ist die thermostabile DNA-Polymerase, die aus dem thermophilen Bakterium Thermus aquaticus isoliert wurde. Bei dem vorliegenden Enzym handelt es sich um eine modifizierte Variante, die rekombinant in E. coli exprimiert wurde. My-Budget Hot-Start Taq-DNA-Polymerase wird durch Inkubation bei 95°C bis 97°C über einen Zeitraum von 15 Minuten aktiviert. Dadurch wird die unspezifische Bindung von Primern und die Bildung von Primer-Dimeren bei niedrigen Temperaturen zu Beginn der PCR verhindert.

Unitdefinition: Ein Unit ist die Enzymmenge, die benötigt wird, um 10 nmol dNTP in 30 min bei 74ºC in eine säureunlösliche Form umzuwandeln.

Enzymaktivitäten: my-Budget Hot-Start Taq-DNA-Polymerase ist eine hochprozessive 5’ -> 3’-DNA-Polymerase mit 5’ -> 3’-Exonukleaseaktivität. Eine 3’ -> 5’-Exonukleaseaktivität fehlt vollständig. Zusätzlich fügt das Enzym einzelne Nukleotide (fast ausschließlich Adenosin) an die 3´-Enden der DNAs an, so dass eine TA-Klonierung ohne weitere Modifizierungen möglich ist.

Lösung S (10x) eignet sich zur Verbesserung der Amplifikationsergebnisse bei schwierigen DNA-Templates (z. B. GC-reiche Templates). Die Lösung sollte nur in einer definierten Konzentration (1x, 2x oder 3x Konzentration) und zusätzlich zum Reaktionspuffer eingesetzt werden.

Bis zu einem Monat bei Raumtemperatur stabil!